标准品细胞实验常用溶剂方法

生理盐水

 

成分： 0.9% NaCl 溶液。

优点： 等渗、简单。

用途： 主要用于快速洗涤细胞以去除培养基或药物残留。缓冲能力非常弱，不适合长时间孵育或作为处理溶剂。

细胞培养基

成分： 基础培养基（如DMEM, RPMI 1640） + 血清（如FBS） + 可能添加的抗生素、生长因子等。

优点： 最接近细胞生长的生理环境，提供所有必需的营养物质、生长因子、激素和缓冲系统（通常含碳酸氢钠/CO?）。

用途：

首选溶剂： 用于活细胞处理（如药物处理、染料孵育、转染试剂复合物形成）的首选溶剂。将待测化合物用完全培养基稀释至所需工作浓度后直接加入培养细胞中。

维持细胞活性： 在需要较长时间（数小时到数天）暴露于化合物时，培养基是维持细胞活力和功能的最佳选择。

注意事项： 血清中的蛋白质可能结合某些化合物（如小分子药物、脂质体），影响其生物利用度。进行无血清实验时，需使用无血清培养基或基础培养基（需补充必要的因子如胰岛素、转铁蛋白、硒等）。

 有机溶剂/助溶剂 (用于难溶于水的化合物)
关键原则： 有机溶剂本身通常对细胞有毒性，必须严格控制终浓度（一般 ≤ 0.5% v/v，最好 ≤ 0.1%），并且在实验中必须设置相应的溶剂对照组（即只含相同浓度溶剂的培养基/缓冲液处理组），以排除溶剂本身对细胞的影响。

二甲基亚砜

优点： 溶解能力强（尤其对疏水性小分子），穿透性好，在低温下保护细胞（用于冻存）。

用途：

溶解难溶于水的化合物（如许多小分子药物、荧光染料）。通常先配制成高浓度母液（如100-1000倍于工作浓度），使用时用培养基或缓冲液稀释至终浓度（DMSO终浓度 ≤ 0.5%）。

细胞冻存（常用10% DMSO + 90% FBS或培养基）。

注意事项：

细胞毒性： 高浓度对细胞有剧毒。终浓度严格控制在0.5%以下（常用0.1%）。

吸水性： 易吸水，需密封保存。

溶剂对照： 必须设置DMSO溶剂对照组！

可能影响某些细胞信号通路。

乙醇

优点： 溶解一些中等极性的化合物，相对易挥发。

用途：

溶解某些药物或化合物。

细胞固定（常用70%乙醇）。

注意事项：

细胞毒性： 高浓度有毒且使蛋白质变性。用于活细胞处理时终浓度需 ≤ 0.5%。

溶剂对照： 必须设置乙醇溶剂对照组！

挥发性可能导致处理液浓度变化。

甲醇/丙酮

用途： 几乎只用于细胞固定和透化步骤（免疫荧光、免疫细胞化学）。它们能快速穿透细胞，固定蛋白质并去除脂质（透化）。

注意事项： 对活细胞有剧毒且不可逆，绝不能用于需要细胞存活的实验步骤（如药物处理、活细胞成像、功能检测）。固定后需彻底洗去。

其他助溶剂（使用更少，需特别谨慎）

吐温80/聚山梨酯80： 非离子表面活性剂，可助溶极疏水物质。但本身可能具有细胞毒性并干扰细胞膜。浓度需极低（如0.01-0.1%），必须设溶剂对照。

聚乙二醇： 有时用于助溶或改变溶液性质。需注意粘度和潜在影响。

环糊精： 能包裹疏水分子增加其水溶性，毒性相对较低，但价格较高，需优化浓度。